微生物菌的存货条件（即保存条件）需根据菌种类型、用途及保存时长等因素综合确定，核心目标是维持菌体活性、防止变异或死亡。以下是微生物菌保存的关键条件及注意事项：

一、基础保存条件

温度控制

低温保存：

4℃短期保存：适用于需频繁使用的菌种（如实验室常用菌株），可保存数周至数月，但长期保存易导致菌体代谢减缓、活性下降。

-20℃或-80℃低温保存：适用于长期保存（数月至数年），需配合保护剂（如甘油、DMSO）防止冰晶损伤细胞。

液氮冷冻保存（-196℃）：适用于珍贵菌种或长期研究，需使用专用冻存管和程序降温仪，避免细胞内水分结冰。

保护剂使用

甘油：常用终浓度为10%-20%，可降低冰点、减少冰晶形成，保护细胞膜完整性。

DMSO（二甲基亚砜）：适用于某些特殊菌种，但需控制浓度（通常≤10%），避免毒性。

脱脂牛奶或血清：适用于某些敏感菌种，提供营养和保护作用。

厌氧/需氧环境

需氧菌：保持通风或微氧环境，防止缺氧导致代谢异常。

二、不同保存方法的适用场景

斜面保存法

条件：4℃冷藏，菌种接种于固体培养基斜面。

适用：短期保存（1-3个月），需定期转接（每1-2个月）以维持活性。

缺点：易污染、菌种易退化。

液体石蜡覆盖法

条件：在斜面菌种上覆盖无菌液体石蜡，隔绝氧气，4℃保存。

适用：中等期限保存（6-12个月），减少转接次数。

缺点：石蜡可能污染菌种，需严格无菌操作。

冻干保存法（冷冻干燥）

条件：菌液与保护剂混合后，快速冷冻并抽真空干燥，密封于安瓿瓶。

适用：长期保存（数年至数十年），菌种活性稳定。

缺点：设备昂贵，操作复杂，需专业人员。

低温冰箱保存

条件：菌液与保护剂混合后，分装于冻存管，-80℃保存。

适用：中长期保存（1-5年），操作简便。

缺点：需定期检查冰箱温度，避免反复冻融。

三、关键注意事项

无菌操作：所有保存步骤需在无菌环境下进行，防止杂菌污染。

标签标识：清晰标注菌种名称、保存日期、操作者信息，便于追溯。

定期复苏：长期保存的菌种需定期复苏（如每年一次），检查活性并更新保存。

避免反复冻融：低温保存的菌种应一次性分装，避免多次解冻导致细胞损伤。

特殊菌种处理：

产孢子菌（如芽孢杆菌）：可干燥保存或制成孢子悬液，耐受力强。

病毒或噬菌体：需与宿主细胞共保存，或使用专用保存液。

四、不同菌种的保存差异

菌种类型 推荐保存方法 保存期限

斜面/甘油管（-80℃） 短期：数月；长期：数年

 斜面/液体石蜡覆盖 6-12个月

病毒/噬菌体 宿主细胞共培养或专用保存液 数月至数年

五、实际应用建议

实验室常用菌种：优先选择低温冰箱（-80℃）或冻干保存，兼顾操作简便与长期稳定性。

工业生产菌种：根据生产周期选择斜面短期保存或冻干长期保存，确保菌种一致性。

珍贵或稀有菌种：采用液氮冷冻或冻干保存，并备份多份。

通过合理选择保存方法并严格控制条件，可有效延长微生物菌的存活时间，保证研究或生产的顺利进行。